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4×SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(pH6.8)图片
产品货号:
GL1408
中文名称:
4×SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(pH6.8)
英文名称:
产品规格:
100mL|500mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

本试剂为配制SDS-PAGE浓缩胶的缓冲液,可用于配制各种浓度的变性及非变性PAGE凝胶,方便、快捷,产品中已加入10% SDS,使用时不用另外加入。




组分100mL500mL
4×SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(pH6.8)100mL500mL
说明书1份1份

保存:室温,有效期1年。


凝胶模具、30% Acr-Bis(29:1)、10%APS(过硫酸铵)、TEMED、蒸馏水


  • 过硫酸铵配制成10%溶液后应当-20℃保存,应尽量减少室温存放时间以防失效,有效避免失效的方法是分成小份,-20℃保存,用2~3次,剩余的弃用,亦可4℃保存几天。
  • TEMED易挥发,使用后请盖紧瓶盖,另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切,可通过适当调节TEMED的用量,控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。
  • 配制聚丙烯凝胶的过程中,如果室温较低,可以置于37℃放置,加速凝固。
  • 30% Acr-Bis(29:1)有轻微神经毒性,请小心操作。
  • 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
  • 试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。



根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度,最佳胶浓度请参考附表1。
  • 灌制分离胶
    各试剂使用量请参考附表3。
    • 参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具(注:加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触,是否加入上层筛板可根据实际情况选择)。
    • 将30% Acr-Bis(29:1)、分离胶缓冲液和蒸馏水在小烧杯或试管中混合。
    • 加入10% APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
    • 在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5cm或距梳齿约0.5cm即可),然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1~2cm的水层,使凝胶表面保持平整。
    • 静置30~60min,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,表面凝胶已聚合。
  • 灌制浓缩胶
    各试剂使用量请参考附表2。
    • 小心倾倒出覆盖在分离胶上的水层。
    • 将30% Acr-Bis(29:1)、浓缩胶缓冲液和蒸馏水在一个小烧杯或试管中混合。
    • 加入10% APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
    • 将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
    • 将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
    • 静置10~20min,等待浓缩胶聚合。
    • 待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。
    • 进行常规电泳操作。



附表1.不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围
SDS-PAGE分离胶浓度最佳分离范围
6%50~150kD
8%30~90kD
10%20~80kD
12%12~60kD
15%10~40kD


附表2.配制5%SDS-PAGE的浓缩胶
凝胶
体积
配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(mL)
蒸馏水Acr-Bis(30%,29:1)4×浓缩胶缓冲液10% APSTEMED
2mL1.140.340.50.020.004
4mL2.280.6810.040.008
6mL3.421.021.50.060.012
8mL4.561.362.00.080.016


附表3.配制SDS-PAGE分离胶
分离胶
浓度
凝胶
体积
配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(mL)
蒸馏水30% Acr-Bis(29:1)4×分离胶缓冲液10% APSTEMED
6%5mL2.751.01.250.050.004
10mL5.52.02.50.10.008
15mL8.253.03.750.150.012
20mL114.050.20.016
8%5mL2.421.331.250.050.003
10mL4.82.72.50.10.006
15mL7.254.03.750.150.009
20mL9.75.350.20.012
10%5mL2.081.671.250.050.002
10mL4.173.332.50.10.004
15mL6.255.03.750.150.006
20mL8.36.750.20.008
12%5mL1.752.01.250.050.002
10mL3.54.02.50.10.004
15mL5.256.03.750.150.006
20mL7.08.050.20.008
15%5mL1.252.51.250.050.002
10mL2.55.02.50.10.004
15mL3.757.53.750.150.006
20mL5.010.050.20.008

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